丁愛萍 謝良生 藍翠鈺 張艷春

(深圳市城管局園林科研所518003)

摘要 以美人蕉莖尖為外植體舉行快速繁殖。在MS+2mg/l BA+0.2mg/l NAA的培育基上得到愈傷組織，該愈傷組織在MS+5mg/1BA+1mg/l NAA的培育基上分化出不定芽。在MS+5mg/l BA的培育基上，接種莖尖直接長成無根新梢。在1/2MS+0.5mg/l NAA的培育基上，無根苗生根長成完整植株。6～8cm高小苗可出瓶移栽，成活率為100%。

下午詞 美人蕉；莖尖培育；快速繁殖

美人蕉(Canna generalis Bailey)為我市主栽的行道花卉和花壇花卉之一，具有較強的觀賞性。但由于多年來一直采取分切根狀莖的方式舉行繁殖，出現(xiàn)病毒病害及品種退化問題。延續(xù)的營養(yǎng)繁殖，使得病毒迅速流傳，病情逐年加重。而病毒病害是藥物防治不能消除的。采取現(xiàn)代生物技術(shù)方式對美人蕉舉行莖尖脫毒，再用組織培育法得到無病毒種苗，進一步確立無病毒種苗無性系并舉行快速繁殖，可迅速得到大批量優(yōu)質(zhì)、無病毒美人蕉種苗，從而，從基本上解決美人蕉花葉病問題。本文報道了美人蕉莖尖脫毒及確立美人蕉無病毒種苗無性系的研究效果。

1 材料與方式

1．1 材料

供試材料為大花美人蕉品種：深圳紅，深圳粉，優(yōu)麗，大金邊，鴛鴦，總統(tǒng)，金脈，阿旺，二喬，橘紅大花。

1.2 外植體處理

取帶芽胞的美人蕉根莖，常規(guī)消毒后用75%乙醇棉擦拭，再用0.1% HgCl2消毒10分鐘，無菌水沖洗5次。在超凈臺上，剖解鏡下剝?nèi)∏o尖，大小控制在0.5～1 mm，接種在培育基上。

1.3 培育基

脫分化培育基：MS+2 mg/l BA+0.2 mg/l NAA

分化培育基：MS+5 mg/l BA+1 mg/l NAA

直接生長培育基：MS+5 mg/l BA

生根培育基：1/2MS+0.5 mg/l NAA

1．4 培育條件

培育溫度為28±2℃，光照強度為1500 Lux，每天光照10小時。

2 效果與分解

2．1 外植體接種污染率由50%降低到1～5%

由于所取外植體為生長在土壤中的根莖，含有大量雜菌，很難消毒，采取封鎖式振搖滅菌法[1]，使大批量接種的接種污染率降低到5%以下。

2．2 誘導脫分化并形成愈傷組織

在脫分化培育基上，經(jīng)30～40天培育有45～53%的外植體形成黃綠色形態(tài)較好的愈傷組織。供試的8個不同激素配比的培育基，其上接種的外植體，都或多或少地可發(fā)生愈傷組織，有的愈傷組織質(zhì)地較硬，有的較松散，這些愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培育基后，都不分化不定芽。只有在脫分化培育基上發(fā)生的黃綠色的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培育基后，才會分化出不定芽。

2．3 誘導愈傷組織分化不定芽

將脫分化培育基上發(fā)生的愈傷組織轉(zhuǎn)到分化培育基上，經(jīng)約35天培育，約莫80%的愈傷組織上可發(fā)生3～4個不定芽。

2．4 接種莖尖直接長大，形成無根新梢

在MS+5 mg/l BA培育基上，有約50%的接種莖尖，經(jīng)40～50天培育，莖尖逐步發(fā)育成芽。

2.5 不定芽擴大繁殖

長到2～3 cm高的不定芽，再轉(zhuǎn)到MS+5 mg/l BA的培育基上，經(jīng)30天培育，在每個芽的基部長出3～4個側(cè)芽，這樣，每個繼代都以3～4倍的速度不停擴大繁殖。

2．6 形成完整植株

在繁殖歷程中，將長到3 cm左右的小苗轉(zhuǎn)到生根培育基上，經(jīng)15天培育，可在基部長出3～4條根，這時即可出瓶移栽。

2．7 移栽成活

出瓶前，需打開瓶口，練苗2-3天，移栽時不能傷根。移栽的較佳溫度為18～25℃，移栽初期應保持60%以上的相對濕度，并制止陽光直射，土壤使用普通園土即可。到達以上條件時，移栽苗成活率險些到達100%。

3 討論

美人蕉莖尖培育難度較大。首先。舉行莖尖脫毒，需取小于1 mm的莖尖，才能保證脫除CMV病毒，但小莖尖培育成活難度較大，下午技術(shù)是剝?nèi)∏o尖時勿使莖尖受傷褐化，操作速度又要快，勿使組織在空氣中露出時間過長。第二，莖尖培育成活后，誘導其分化出側(cè)芽，需較大量細胞盤據(jù)素，但同時細胞盤據(jù)素過量，就會發(fā)生玻璃苗。下午技術(shù)是，將培育基中BA控制在5 mg/l，即可保證小苗以3～4倍的速度擴大繁殖，又可制止出現(xiàn)玻璃苗。第三，確立無病毒種苗無性系后要防止其老化，我們的經(jīng)驗是2～3年舉行一次更新，以保持其較高的繁殖速度。

參考文獻

[1] 丁愛萍等.紅掌組織培育研究.中國花卉園藝，2003(5)：24-26.